Раз в месяц мы отправляем дайджест с самыми популярными статьями.

ОЗОНОТЕРАПИЯ В ПРЕГРАВИДАРНОЙ ПОДГОТОВКЕ СУПРУЖЕСКИХ ПАР С НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ РАННИХ СРОКОВ В АНАМНЕЗЕ

Е.Л. Бойко, Н.Ю. Сотникова, О.Г. Ситникова, А.С. Серебренников

ФГБУ «Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, г. Иваново

 

Abstract

The article provides information on the successful use of ozone therapy in pregravid preparation of couples with recurrent early pregnancy in anamnesis, including for correcting male factor. Given pathogenetic substantiation of the clinical efficacy of this method of treatment, describes its effects on immunological parameters, parameters of lipid peroxidation, the level of antioxidant protection in different environments of the body, including the ejaculate. Also article contains the analysis of pregnancy after this type of treatment.

 

Key words: miscarriage, ozone therapy, pregravid preparation

 

В статье приводятся данные об успешном использовании озонотерапии в прегравидарной подготовке супружеских пар с невынашиванием беременности ранних сроков в анамнезе, в том числе для коррекции «мужского» фактора. Дается патогенетическое обоснование клинической эффективности данного способа лечения, описывается его воздействие на иммунологические показатели, параметры липопероксидации, уровень антиоксидантной защиты в различных средах организма, в т.ч. эякуляте. Представлен анализ течения беременности после данного вида подготовки.

 

Ключевые слова: невынашивание, озонотерапия, прегравидарная подготовка

 

В современной литературе решение проблемы прегравидарной подготовки супружеской пары при планировании беременности в большинстве случаев имеет одностороннюю направленность, при которой «мужской» фактор учитывался недостаточно [1, 2]. Исследование участия «мужского» фактора в патогенезе нарушений репродуктивной функции в семье получило свое развитие в последние десятилетия прежде всего благодаря появлению современных информативных методов исследования мужской репродуктивной функции. Положительные результаты использования озонотерапии в комплексе ранней реабилитации женщин с невынашиванием беременности, а также значительное количество публикаций, свидетельствующих о многогранном положительном воздействии озона на иммунитет, эндокринную систему, антиоксидантный потенциал организма [3-9]  позволили нам сделать предположение о патогенетической обоснованности использования озонотерапии в предгравидарном периоде при оздоровлении женщин и мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности ранних сроков.

Цель исследования: изучить возможности озонотерапии в прегравидарной подготовке супружеских пар с невынашиванием беременности ранних сроков в анамнезе, в т.ч. с целью коррекции «мужского» фактора.

Материал и методы исследования

Было обследовано 247 супружеских пар (120 из них получали в комплексе с традиционным лечением  озонотерапию, 127 женщин и мужчин – лишь традиционную терапию). Озонотерапия проводилась в I фазу менструального цикла, через день внутривенной капельной инфузией физиологического раствора в течение 20 минут со скоростью 8-10 мл/мин. Озонирование физиологического раствора осуществлялось с помощью установки озонотерапевтической с деструктором озона УОТА-60-01-«Медозон». Методом барботажа озонокислородная газовая смесь пропускалась через флакон емкостью 400 мл со стерильным 0,9% раствором натрия хлорида для получения необходимой концентрации озона в растворе (2,5-3,5 мг/л). Учитывая сравнительную нестабильность озона в водной среде, озонированный физиологический раствор использовали сразу же после получения. Количество инфузий – 5-6 на курс. Парентеральное введение сопровождалось местным применением озона, при котором вагинальные инстилляции сочетались с обработкой промежности у женщин и уретры у мужчин озонированным физиологическим раствором с концентрацией озона 8-10 мг/л. Курс локальной терапии состоял из 8-10 ежедневных сеансов. Местное лечение женщин и мужчин затем продолжали с использованием озонированного масла «Озонид» в течение 10 ежедневных процедур. Для оценки эффективности реабилитационных мероприятий нами были взяты группы больных, однотипных по своей клинической характеристике.

Всем пациентам проводилось общеклиническое, иммунологическое, иммуноферментное, иммунохимическое, биохимическое, морфологическое, цитологическое, бактериологическое исследование, проводилось исследование спермограмм.

Определение относительного содержания основных популяций лимфоцитов, моноцитов, нейтрофилов в периферической крови и в эндометрии с использованием моноклональных антител, меченных ФИТЦ: CD3+, CD8+, CD16+, CD20+, CD25+, CD38+, CD11b+, CD71+, CD72+, CD95+, СD4+СD38+, СD4+СD71+, СD4+СD25+ – и меченных фикоэритрином: CD4+, HLA-DR+ (НПЦ «МедБиоСпектр» г. Москва, Россия) – методом двухцветной проточной цитофлюориметрии на приборе FACScan («Becton Dickinson» USA); определение основных классов иммуноглобулинов (G, А, M) методом радиальной иммуноинфузии по Манчини, уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови — по методу Гриневича Ю.С. и Алферова А.Н. (1981) в модификации.

В мазках-соскобах из цервикального канала методом ПЦР в реальном масштабе времени определяли наличие ДНК вируса простого герпеса (HSV) 1-2 типа; цитомегаловирусу (CMV); Chlamydia trachomatis; Ureaplasma urealyticum; Mycoplasma hominis с использованием коммерческих систем НПФ «ДНК-Технология» (Россия) на приборе iCycler (BIO-RAD, США). Прямая иммунофлюоресценция с выявлением хламидий, микоплазм, уреаплазм и вируса простого герпеса II типа проводилась с использованием набора моноклональных антител, меченных флюоресцирующим изотиоциантом (ФИТЦ), научно-производственной фирмы «ЛАБдиагностика».

В периферической крови определяли наличие IgM и IgG к HSV 1,2; СMV; Toxoplasma gondii; Chlamydia trachomatis; в мазках-соскобах из цервикального канала выявляли растворимый Ag к Chlamydia trachomatis; HSV 1,2; Ureaplasma urealyticum; Mycoplasma hominis; Gardnerella vaginalis; Candida albicans; Neisseria gonorrhoeae; Trichomonas vaginalis; Streptococcus serogroup «А» на шариковых носителях с использованием высокоспецифичных моноклональных антител (антигенов) в соответствии с инструкцией фирмы АВВОТТ Laboratoris. В качестве считывающе-регистрирующего устройства применяли диагностическую систему QUANTUM-II.

Определение в менструальной крови уровня растворимого антигена лейкоцитов-2 (РАЛ-2) осуществляли методом двойной иммунодиффузии в агаре по Оухтерлони в модификации Храмковой Н.И. и Абелева Г.И. с использованием стандартных тест-систем. Чувствительность тест-систем для РАЛ-2 – 5 мкг/мл. Тест-системы изготовлялись сотрудниками кафедры биохимии Московского Государственного медицинского Университета (зав. кафедрой – акад. РАЕН, д.м.н., проф. Татаринов Ю.С.), исследования проводили в иммунохимической лаборатории ФГБУ «Ив НИИ М и Д им. В.Н. Городкова» МЗ РФ.

Содержание малонового диальдегида определяли по методу Jagy K., Nichigaci J., Chama H.; общей антиоксидантной активности (ОАОА) – по методу Al-Timiti D.L., Doimandy T.U. (1974), в модификации Промыслова М.М., Дамчука П.Л. (1990). Общую антиокислительную активность (ОАОА) плазмы крови исследовали на биохемилюминометре БХЛ-06.

Определение гонадотропных и стероидных гормонов (ФСГ, ЛГ, эстрадиола, прогестерона) в сыворотке периферической крови осуществлялось на системе «ARCUS-1230 Fluorometer» фирмы Delphia на 5-7 и 21-22 дни менструального цикла.

Исследование соскобов из полости матки проводили с использованием иммерсионной системы при увеличении 1350. На гистологических препаратах оценивались гормональные и воспалительные нарушения эндометрия.

Качественный и количественный состав микрофлоры влагалища, цервикального канала и уретры оценивали с использованием методов окраски по Грамму и гемотоксилином-эозином. Пациентам с кольпитами и бактериальным вагинозом проводилось бактериологическое обследование содержимого влагалища и цервикального канала с целью идентификации возможного возбудителя воспалительного заболевания и определения чувствительности его к антибиотикам.

Для статистической обработки результатов исследования в качестве основного программного обеспечения использовали пакет прикладных программ STATISTICA. Достоверность различий сравниваемых показателей определялась по t-критерию Стьюдента. Расчеты среднего арифметического и ошибки среднего арифметического проводились с использованием программы Excel из комплекта Microsoft Office.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты сравнительного анализа данных бактериологического исследования до и после лечения показали, что комплексное лечение с использованием озона эффективнее, по сравнению с традиционным лечением, подавляло рост условно-патогенных микроорганизмов.

Так, после комплексной озонотерапии, достоверно реже определялась грамположительная палочковая флора, в два раза уменьшилась доля женщин, у которых выявлена грамотрицательная кокковая флора. Восстановление нормального уровня лейкоцитов и клеток эпителия было зафиксировано у 87% пациенток после обработок озоном и только у 60% — после медикаментозного лечения. Комплексная терапия с использованием вагинальных инсуффляций озонокислородной смеси оказалась значительно более щадящей по отношению к естественной вагинальной микрофлоре: процент пациенток с нормальным содержанием лактобацилл в мазках по окончании курса даже увеличился и составил 88,7%, тогда как после медикаментозного лечения наличие лактобацилл в мазках зафиксировано лишь у 37% пациенток. После комплексного лечения с использованием медицинского озона снизилось количество пациенток, больных хламидиозом, в периферической крови наблюдалось достоверное снижение частоты выявления IgМ к ВПГ. Полученные нами результаты вполне согласуются с мнением других авторов, которые выявили антибактериальное, противовирусное, фунгицидное действие озона [5, 6].

Достаточно быстрый и устойчивый эффект от лечения мы связываем также с активацией клеточных и гуморальных звеньев иммунитета, что приводит к восстановлению механизмов резистентности, сдерживающих размножение бактерий и вирусов, способствующих элиминации возбудителей из очага поражения и ограничению дальнейшего распространения воспалительного процесса. Полученные нами результаты согласуются с данными других авторов, которыми выявлены антисептические, противовоспалительные свойства озона при его локальном использовании, в частности, в хирургии, в акушерстве и гинекологии [3].

Существенным изменениям под действием комплексной озонотерапии подвергалась функция яичников, причем эти позитивные изменения имели место и непосредственно в цикле лечения, и в следующем за ним менструальном цикле. У большинства женщин полностью восстанавливалась функция желтого тела, о чем свидетельствовало повышение концентрации прогестерона до показателей средней фазы секреции (82,0%). Дополнительная оценка менструальной функции, проводимая по тестам функциональной диагностики в следующем после лечения менструальном цикле, показала, что применение комплексной терапии с включением медицинского озона способствовало более быстрому и полному восстановлению функционального состояния яичников по сравнению с традиционным лечением. После медикаментозной терапии полноценная овуляторная двухфазная кривая базальной температуры имела место менее чем у половины больных, а у 16% пациенток базальная температура продолжала свидетельствовать о чередовании НЛФ с ановуляторными циклами. Полученные результаты стимулирующего воздействия медицинского озона на выработку  прогестерона согласуются с данными других авторов [7-9].

Наиболее полное восстановление функции эндометрия у женщин, получавших озонотерапию, можно связать, в том числе, с эффектом преодоления хронического воспалительного процесса в эндометрии. В третьем после комплексного лечения менструальном цикле в менструальной крови у женщин  мы не обнаружили повышенных показателей РАЛ-2, в то время как у 39,4% пациенток, которым проводилась медикаментозная терапия, сохранялись признаки хронического эндомиометрита (показатели РАЛ-2 в менструальной крови равные и выше 640 мкг/мл). После комплексного лечения с применением медицинского озона количество высоких индивидуальных показателей РАЛ-2 (640 мкг/мл и выше) по сравнению с традиционным лечением снижалось в 2,9 раза и в 4,3 раза повышалось количество средненормативных индивидуальных значений протеина (рис. 1).

Рис. 1. Содержание РАЛ-2 в менструальной крови в третьем цикле у женщин с невынашиванием беременности ранних сроков при использовании разных видов терапии.

 

Рис. 2. Влияние различных видов терапии на содержание РАЛ-2 в спермальной жидкости мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности ранних сроков.

 

Отмечалась также положительная динамика в содержании РАЛ-2 в спермальной жидкости, уровень которого непосредственно связан с количеством лейкоцитов в эякуляте и отражает остроту воспалительного процесса в органах репродуктивной системы мужчин (рис. 2). Концентрация протеина после комплексного лечения снижалась, что, на фоне снижения частоты выявления хронической персистирующей инфекции, свидетельствовало о стихании воспалительного процесса в предстательной железе.

 

 Рис. 3. Влияние различных видов терапии на основные показатели спермограммы мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности.

 

В условиях специализированного приема уролога-андролога мы оценили влияние комплексного лечения с применением медицинского озона на показатели репродуктивного здоровья у мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности ранних сроков. Выяснилось, что улучшение показателей спермограммы (снижения вязкости эякулята, количества лейкоцитов и морфологически измененных форм, исчезновение феномена агглютинации сперматозоидов и повышения количества лецитиновых зерен в поле зрения) чаще наблюдалось после комплексной озонотерапии по сравнению с традиционным лечением (рис. 3). Однако подвижность сперматозоидов после озонотерапии оставалась несколько ниже таковой у здоровых мужчин с ненарушенной фертильностью.

Исследование основных параметров клеточного и гуморального иммунитета на фоне озонотерапии выявило у женщин и мужчин нормализацию Т-клеточного и гуморального звеньев иммунитета, что проявлялось в оптимизации количества зрелых Т-лимфоцитов (CD3+) и уровня Т-хелперов (CD4+). Также у обоих супругов наблюдалась нормализация экспрессии активационных маркеров (CD25+) и Ig G. Данный аспект весьма важен, так как иммуноглобулины G обладают блокирующим действием и обеспечивают иммуносупрессивную защиту плода от иммунной атаки материнского организма. Кроме этого, у женщин после озонотерапии наблюдалась нормализация уровня активированных CD71+ лимфоцитов и миграционной активности лейкоцитов, снижение ЦИК, а у мужчин – повышение экспрессии CD38+ клеток на поверхности лимфоцитов. Полученные нами результаты согласуются с мнением многих исследователей, отмечающих корригирующее влияние медицинского озона на клеточный и гуморальный иммунитет [3, 4, 10]. Следует отметить, что независимо от вида терапии у женщин и мужчин в парах с невынашиванием беременности ранних сроков содержание цитотоксических лимфоцитов (СD8+) после лечения оставалось ниже такового в группе контроля.

Традиционная медикаментозная терапия у женщин и мужчин не приводила к восстановлению измененного функционального дисбаланса иммунокомпетентных клеток.

По нашим данным, озонотерапия оказывала выраженный положительный эффект в отношении антиоксидантной системы защиты (АОСЗ) и процессов перекисного окисления липидов у обоих супругов из пар с невынашиванием беременности ранних сроков. На фоне комплексного восстановительного лечения в большинстве случаев отмечалась нормализация индивидуальных показателей МДА у женщин и мужчин (85,9% и 81,3%) и ОАОА (66,2% и 81,2%).

При проведении традиционной терапии, нормализация МДА наблюдалась лишь у 18,9%  женщин и 7,7%  мужчин, а ОАОА – у 21,6% женщин и 30,8% мужчин, что свидетельствует о несостоятельности у них антиоксидантной активности организма. По-видимому, при исходном прооксидантном сдвиге, который характерен для женщин и мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности, озон активирует АОСЗ и тем самым оказывает противовоспалительное действие.

Наши наблюдения продемонстрировали положительное влияние комплексного лечения с применением медицинского озона на процессы ПОЛ и ОАОА в спермальной жидкости. После комплексного лечения мужчин из супружеских пар с невынашиванием беременности на фоне отсутствия выраженной динамики показателей МДА после лечения наблюдалось усиление антиоксидантной системы защиты в эякуляте. В 4,2 раза после озонотерапии увеличивалось количество повышенных до нормы индивидуальных значений ОАОА, тогда как после медикаментозного лечения количество больных с пониженным уровнем ОАОА было в 2,1 раза больше (рис. 4).

Рис. 4. Сравнительная характеристика индивидуальных показателей антиоксидантной активности в спермальной жидкости мужчин в отдаленном периоде после разных видов терапии

 

Данные наблюдения полностью соотносятся с многочисленными литературными источниками, свидетельствующими о стимулирующем воздействии низких концентраций озона на антиоксидантную систему организма, в т.ч. у беременных[11-14], что имеет большое патогенетическое значение [15, 16].

Дальнейшие наблюдения показали, что запланированная после прегравидарной подготовки с включением озонотерапии беременность, протекала с меньшим количеством осложнений по сравнению с таковой у женщин из супружеских пар, получавших лишь традиционную терапию. Частота угрозы прерывания в I триместре беременности была меньше в 2,1 раза, во II триместре – в 1,9 раза, в III триместре – в 1,5 раза;  гестоза первой половины беременности — в 2 раза, анемии — в 1,4 раза. Женщины, получавшие озонотерапию, во все сроки гестации реже болели респираторно-вирусными инфекциями; лишь у  7,8% из них развилось многоводие и у 10,9% — обострение хронического пиелонефрита, что было достоверно реже, чем у женщин группы сравнения.

Осложнения родового акта у женщин после комплексной терапии с использованием медицинского озона также отмечены значительно реже, чем у женщин после  традиционной терапии. У этих рожениц в 2,3 раза реже развивались аномалии сократительной деятельности матки и в 5,3 раза — патологический прелиминарий, в сравнении с женщинами, которым назначался курс традиционных профилактических мероприятий. По-видимому, озон, улучшая состояние гемодинамики и усиливая интенсивность окислительно-восстановительных процессов в тканях, стимулируя гормональную функцию фето-плацентарного комплекса, способствует повышению энергетического потенциала клеток миометрия и положительно влияет на сократительную способность матки [3,7]. Особого внимания заслуживает тот факт, что у рожениц после использования медицинского озона в 2,5 раза реже встречается ранее излитие околоплодных вод, что, по-видимому, свидетельствует об активации антиокислительных ферментов и стабилизации клеточных мембран, в том числе в плодных оболочках, под воздействием медицинского озона [9, 15, 16].

Своевременными родами беременность чаще заканчивалась после комплексного восстановительного лечения с использованием медицинского озона, тогда как после медикаментозной терапии в 3,1 раза чаще — преждевременными родами.

У женщин, в реабилитации которых были использованы традиционные медикаментозные методы, частота рождения детей с патологией оказалась выше (30,7%): как правило, отмечалась асфиксия легкой (38,1%), средней и тяжелой (16,1%) степени. При использовании медицинского озона в ходе прегравидарной подготовки обоих супругов частота рождения здоровых детей в семье составляла 76,2%, детей с перинатальной патологией — 23,8%.

Озонотерапия приводила к снижению частоты задержки внутриутробного развития плода (ЗРП). Так, у 14,2% беременных, лечившихся традиционными методами, отмечалась ЗРП, тогда как у пациенток, получавших медицинский озон, данная патология развивалась в 2,3 раза реже. У женщин, вне беременности прошедших озонотерапию, средняя масса тела новорожденных достоверно превышала таковую у женщин группы сравнения. Инфекционные заболевания в раннем неонатальном периоде у этих новорожденных возникали значительно реже, эти дети чаще выписывались из родильного дома домой в удовлетворительном состоянии, тогда как новорожденные в группе сравнения в 2,8 раза чаще переводились в отделение второго этапа выхаживания. При дальнейшем обследовании неврологическая симптоматика по типу гипоксического поражения центральной нервной системы у новорожденных от матерей группы сравнения выявлялась в 3 раза чаще, в том числе легкие проявления этого синдрома — в 1,8 раза, средней тяжести и тяжелые – в 5,7 раза, чем у новорожденных, матери которых получали комплексное лечение с использованием медицинского озона. Данные наблюдения свидетельствуют о более надежной адаптации новорожденных в перинатальном периоде [3, 7, 9].

Таким образом, включение медицинского озона в программу комплексного оздоровления женщин и мужчин в парах с невынашиванием беременности в анамнезе способствовало более полному восстановлению репродуктивного здоровья супругов и нормализации состояния иммунитета, антиокислительного потенциала организма, за счет чего имеет место значительное улучшение течения и исхода последующей беременности.

 

Список литературы

  1. Кирющенков П.А., Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. и др. Особенности предгестационной подготовки женщин с синдромом привычной потери беременности на основании определения содержания иммунокомпетентных клеток в периферической крови и эндометрии // Мать и дитя: Материалы VII Российского форума. М., 2005. С. 97.
  2. Кирющенков П.А., Алексеева М.С., Белоусов Д.М. Принципы подготовки к беременности женщин с синдромом привычной потери беременности в I триместре // Consilium Medicum. 2005. Т.7. №7. С. 566-569.
  3. Качалина Т.С., Гречканев Г. О.Озоновые технологии в акушерстве и гинекологии. Нижний Новгород, 2007. 292.
  4. Di Paolo N., Bocci V., Gaggioti E. Ozone therapy editorial review // Int. J. Artificial Organs. 2004. Vol.27. Р.168–75.
  5. Gutierrez M.S., Lezcano I., Baluja Ch. Ozone Inactivation Kinetics of multiple antibiotic resistant strains of bacteria in water // Proceedings of the XV Ozone World Congress. London, 2001. P. 208-218.
  6. Sharma M., Hudson J.B. Ozone gas is an effective and practical antibacterial agent // Am. J. Infect. Control. 2008. Vol. Р.559–563.
  7. Качалина Т.С., Гречканев Г.О. Опыт использования озонотерапии в комплексном лечении невынашивания беременности // Акушерство и гинекология. 2001. № 3. С. 25 — 28.
  8. Гречканев Г.О., Терешкина И.В., Клементе Х.М. с соавт. Эффективность озонотерапии при привычном невынашивании беременности аутоиммунного генеза // Российский вестник акушера-гинеколога. 2009. Т. 9. № 4. С. 41-46.
  9. Серов В.Н., Федорова Т.А., Чернуха Е.А. и др. Медицинская технология «Применение медицинского озона в акушерстве, гинекологии и неонатологии» // Физиотерапия, бальнеология и реабилитация. 2010. № 3. С. 47-55.
  10. Corcho I., Hernandez F., Reyes N. et al. Immune system changes in inflamatory process during ozone therapy applicаtions // Abstracts of 2nd International Symposium on Ozone applications. Havana. 1997. P. 12.
  11. Jiménez Ortega J. C. Modulation of oxidative stress by ozone therapy: innovation and harmony in the integrated treatment of skin malignancies // Abstracts of II International Medical Ozone Federation Congress and III Mexican Ozonetherapy Association Congress. 2011. Р.54.
  12. Cakir R. Clarifying oxidative stress and antioxidant potentials assays // Abstracts of II International Medical Ozone Federation Congress and III Mexican Ozonetherapy Association Congress, 2011. Р. 59.
  13. Клементе Апумайта Х.М., Мурашко А.В., Пак С.В. с соавт. Влияние озонотерапии и гипербаротерапии на гормонопродуцирующую функцию фетоплацентарного комплекса, состояние свертывающей системы крови и морфологию плаценты у больных с хронической плацентарной недостаточностью // Российский вестник акушера-гинеколога. 2010. Т. 10. № 2. С. 35-38.
  14. Клементе Апумайта Х.М., Гречканев Г.О. Воздействие озоно и гипербаротерапии на показатели гемостаза, иммунитета, перекисного окисления липидов у беременных с субкомпенсированной хронической плацентарной недостаточностью // Уральский медицинский журнал. 2010. № 10. С. 141-145.
  15. Клементе Апумайта Х.М., Мурашко А.В., Пак С.В. с соавт. Прогнозирование, диагностика и контроль эффективности терапии хронической плацентарной недостаточности с использованием показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2010. №1. С. 51-53.
  16. Клементе Х.М., Гречканев Г.О. Использование показателей перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы защиты для прогнозирования и диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности // Российский вестник акушера-гинеколога. 2009. Т. 9. № 6. С. 6-9.