Раз в месяц мы отправляем дайджест с самыми популярными статьями.


Вирицидность молекулы озона в условиях коронавирусной инфекции

Как минимум три клинических испытания с использованием большой аутогемотерапии в настоящее время проводятся в Китае, и необходимы дополнительные клинические испытания и данные для подтверждения эффективности озонотерапии в качестве дополнительной терапии при заболеваниях COVID-19.

Заслуживает внимания опыт применения инфузий озонированного физиологического раствора у пациентов с коронавирусной инфекцией в клиниках Испании под руководством президента международной ассоциации озонотерапевтов Адрианы Шварц.

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ…

МЕЖДУНАРОДНЫЙ КОНГРЕСС «Клинические и биологические аспекты применения медицинских газов», САНКТ-ПЕТЕРБУРГ, г. СЕСТРОРЕЦК, САНАТОРИЙ «БЕЛЫЕ НОЧИ» — ММЦ «СОГАЗ» 20 НОЯБРЯ — 22 НОЯБРЯ 2020г.

В конференции примут участие докладчики более чем из 15 стран для того, чтобы поделиться своим опытом с коллегами. Адрес проведения: г. Санкт-Петербург, г. Сестрорецк, 38-й км Приморского шоссе, д. 2. Открытие конференции: 20 ноября 2020г. в 10:00

В настоящее время во всем мире растет интерес к медицинским газам как к терапевтическим средствам, применяемым для лечения заболеваний самого различного генеза, что требует рассмотрения проблем и перспектив развития в области озонотерапии, карбокситерапии, водородотерапии, ксенонотерапии и других медицинских газов в современных условиях, налаживания сотрудничества и обмена опытом между учеными и практикующими специалистами.

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ…


 

Зарубежный опыт применения озонотерапии при коронавирусной инфекции COVID-19

Системная озонотерапия (инфузии озонированного физиологического раствора, обработка озоном аутокрови пациета, ректальные инсуффляции кислородозоновой смеси, питьё озонированной воды) помогает предупредить и оборвать развитие вирусной инфекции в организме, а в случаях осложнений (атипичные пневмонии) – повысить эффективность стандартных лечебных мероприятий или снять необходимость интубации больных.

Имеется положительный зарубежный опыт применения системной озонотерапии при коронавирусной инфекции: Китай, Испания, Италия, США и ряд других стран.

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ…

Озонопрофилактика и лечение вирусной инфекции

Для профилактики ОРЗ и ОРВИ (в том числе коронавируса) Ассоциация Российских озонотерапевтов рекомендует провести профилактический курс озонотерапии.

Озон обладает вирицидным действием, поскольку в результате перекисного окисления фосфолипидов и липопротеинов капсида неприкосновенность вирусов компрометируется. Окисление вирусов может затруднить в дальнейшем их связывание со специфическими рецепторами клеток.
ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ…

ВЛИЯНИЕ ОКСИДА АЗОТА И ДИНИТРОЗИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ ЖЕЛЕЗА НА АКТИВНОСТЬ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ В КРОВИ IN VITRO

Н.В. Диденко, А.Г. Соловьева, К.Л. Беляева

ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород

 

Abstract

In the article the effect of different concentrations of nitric oxide and dinitrosyl iron complexes (DNICs) on specific activity of antioxidant enzymes of blood in vitro was considered. It was shown that the maximum increase in the specific activity of superoxide dismutase, catalase, glutathione reductase occurred using a concentration of NO — 100 ppm compared to lower concentrations of nitric oxide (20, 50, 75 ppm). The activity of superoxide dismutase (SOD), catalase and glutathione reductase (GR) increased when deposited form NO (DNIC) added to the donor blood in vitro in the ratio of 1:100 and 1:50. The activity of enzymes of the antioxidant system, especially SOD, decreased when adding DNA in a ratio of 1: 25.

Key words: nitric oxide, dinitrosyl iron complexes, superoxide dismutase, catalase, glutathione reductase

 

В статье рассмотрено влияние различных концентраций оксида азота и динитрозильных комплексов железа (ДНКЖ) на удельную активность антиоксидантных ферментов донорской крови в условиях in vitro. В результате эксперимента показано, что при воздействии на донорскую кровь экзогенного NO в виде газового потока максимальное увеличение удельной активности таких антиоксидантных ферментов как супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионредуктаза происходит при использовании концентрации NO — 100 ppm по сравнению с меньшими концентрациями оксида азота (20, 50, 75 ррm). При введении в образцы донорской крови в условиях in vitro депонированной формы NO в виде комплексов ДНКЖ также отмечено повышение активности супероксиддисмутазы (СОД), каталазы и глутатионредуктазы (ГР) в соотношениях 1:100 и 1:50. При добавлении ДНКЖ в соотношении 1:25 наблюдался спад активности ферментов антиоксидантной системы, особенно проявившийся в снижении удельной активности СОД.

Ключевые слова: оксид азота, динитрозильные комплексы железа, супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионредуктаза

Молекулы-метаболиты являются фундаментальной основой функционирования сложных биологических систем, поэтому чрезвычайно большой интерес представляет возможность управления их реакционной способностью, что может быть использовано для регуляции процессов метаболизма [5]. Оксид азота (NO) — уникальный по своей природе и механизмам действия как первичный так и вторичный мессенджер, вовлеченный во множество биохимических и физиологических процессов [3].

В настоящее время известно о полифункциональности действия NO, носящее порой противоположный характер. Условия, при которых защитное действие NO переходит в повреждающее, недостаточно ясны [5]. Исходя из этого не ясно, какие количества NO благоприятны для организма, а какие следует считать увеличенными. Однако при любом подходе к решению проблемы регуляции NO необходимо иметь в виду, что NO — универсальный медиатор метаболизма и резкое изменение его генерации может привести к нарушению функциональной активности многих биосистем [2]. Будучи свободным радикалом, NO имеет короткую продолжительность жизни – около 6—10 с. Поэтому ученые все чаще обращаются к природным формам связывания NO – динитрозильным комплексам железа (ДНКЖ). Известно, что ДНКЖ представляют собой стабильные комплексы, обладающие собственной метаболической активностью и способны выступать в качестве «ловушки» свободных радикалов [1].

Цель работы — изучить влияние различных концентраций оксида азота и динитрозильных комплексов железа на удельную активность антиоксидантных ферментов донорской крови в условиях in vitro.

Материал и методы исследования

Эксперимент был проведен на консервированной крови от пациентов-доноров (n=35). Генерацию оксида азота производили с помощью специализированного аппарата, разработанного в РФЯЦ (Саров). Был выполнен барботаж образцов крови (5мл) газовой смесью в течение 2 минут. В качестве действующих концентраций использованы 20, 50, 75 и 100 ppm NO.

Синтез ДНКЖ осуществляли по методике А.Ф. Ванина с соавт. [1]. Концентрация водного раствора ДНКЖ, взятого в эксперимент, составляла 5 ммоль/л (определялась спектрофотометрически по известным молекулярным экстинкциям при длинах волн 310 и 360 нм). В пробирки, содержащие по 5 мл консервированной крови, добавляли свежеполученный водный раствор ДНКЖ в соотношении 1:150, 1:100, 1:50 и 1:25.

Активность СОД измеряли по ингибированию образования продукта аутоокисления адреналина [7]. Активность каталазы оценивали спектрофотометрическим методом, основанным на определении скорости разложения перекиси водорода каталазой исследуемого образца с образованием воды и кислорода [6]. Активность ГР исследовали методом, основанным на изменении абсорбции раствора при образовании окисленной формы НАД⁺ [6]. Результаты исследований подвергали статистической обработке с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты и обсуждение

Известно, что сама молекула NO обладает антиоксидантными свойствами, что оказывается эффективным способом ограничения активации свободнорадикального окисления [10].

В результате эксперимента показан рост удельной активности СОД донорской крови при воздействии на неё газового потока, содержащего NO во всех выбранных концентрациях. При этом удельная активность энзима находилась в прямой зависимости от повышения концентрации NO. С ростом исследуемых концентраций NO в газовом потоке от 20 до 100 ppm удельная активность СОД возросла в 1,05 раза (р=0,075), в 1,09 раза (р=0,031), в 1,1 раза (р=0,028) и в 1,25 раза (р=0,034) соответственно по сравнению с контролем (табл. 1).

 

Таблица 1. Удельная активность супероксидисмутазы, каталазы, глутатионредуктазы в донорской крови при воздействии на нее оксида азота в условиях in vitro

Условия

эксперимента

Активность СОД, усл.ед./мин*мг b

Активность каталазы, усл.ед./мин*мг b

Активность ГР,

нмоль/мин*мг b

Контроль

245,83±10,13

0,0261±0,0016

106,41±6,76

20 ррm NO

258,11±12,65

0,0317±0,0022*

129,09±11,29*

50 ррm NO

268,06±10,98*

0,0391±0,0029*

121,96±8,06*

75 ррm NO

271,24±13,77*

0,0284±0,0018

122,01±8,75*

100 ррm NO

307,05±19,64*

0,0318±0,0021*

178,75±18,63*

Примечание: * — различия статистически значимы по сравнению с контролем (Р≤ 0,05)

 

Такая динамика изменений функционального состояния фермента может быть объяснена способностью NO регулировать антиоксидантную активность самих энзимов и экспрессию кодирующих их генов [8]. Удельная активность каталазы в донорской крови, обработанной газовой смесью, содержащей 20 ррm NO, возросла статистически значимо по сравнению с контролем в 1,21 раза (р=0,028). Наиболее существенное увеличение удельной активности каталазы отмечено при концентрации NO 50 ppm (в 1,5 раза по сравнению с контролем; р=0,03)4. Воздействие газового потока, содержащего NO в концентрации 75 ppm, не вызвало статистически значимого увеличения удельной активности каталазы. При воздействии на донорскую кровь газового потока NO 100 ppm удельная активность каталазы статистически значимо возросла в 1,22 раза (р=0,031) по сравнению с контролем.

Также установлено увеличение удельной активности ГР при концентрации NO 20 ppm в 1,21 раза (р=0,023), при концентрации NO 50 ррm — в 1,14 раза (р=0,037), при концентрации NO 75 ppm — в 1,15раза (р=0,029) по сравнению с контролем. Максимальное увеличение удельной активности ГР ( в 1,67 раза по сравнению с контролем; р=0,041) наблюдалось при концентрации NO 100 ppm.

Таким образом, показано, что газовый поток, содержащий NO в концентрации 100 ppm, увеличивает удельную активность в донорской крови всех исследуемых антиоксидантных ферментов по сравнению с влиянием на энзимы NO в меньших концентрациях (20, 50, 75 ррm).

Однако в организме основная часть пула NО присутствует в связанной форме, формируя квазистабильные нетоксичные комплексы, что способно существенно уменьшать неблагоприятное действие экзогенного введения NО. Исследование таких комплексов, содержащих NО в депонированной форме, представляет собой актуальную научную проблему, так как они способны мигрировать и накапливаться в разных областях организма, что является одним из факторов избирательности их действия, а также данные комплексы являются природными формами связывания NО, что дает возможность их применения в качестве эффективных и безопасных лекарственных препаратов — доноров NО, обладающих гипотензивным и антиоксидантным действием [9].

Исследование влияния ДНКЖ на активность ферментов антиоксиданой системы показало, что добавление к донорской крови малых количеств водного раствора ДНКЖ (в соотношении 1:150 и 1:100) увеличивает удельную активность СОД в 1,22 раза (р=0,034) и в 1,24 раза (р=0,036) соответственно по сравнению с контролем (табл. 2).

 

Таблица 2. Удельная активность супероксидисмутазы, каталазы, глутатионредуктазы в донорской крови при добавлении в нее ДНКЖ в условиях in vitro

Условия

эксперимента

Активность СОД, усл.ед./мин*мг b

Активность каталазы, усл.ед./мин*мг b

Активность ГР,

нмоль/мин*мг b

Контроль

219,73±19,56

0,0328±0,0012

74,39±3,26

1:150

267,65±22,03*

0,0304±0,0008*

117,48±8,15*

1:100

271,54±25,47*

0,0343±0,0016

138,34±10,48*

1:50

224,63±22,01

0,0358±0,0017*

145,15±17,64*

1:25

172,59±16,28*

0,0301±0,0008*

121,47±9,85*

Примечание: * – различия статистически значимы по сравнению с контролем (р≤ 0,05)

 

Известно, что ДНКЖ обладают метаболической активностью и проявляют собственные антиоксидантные свойства. Однако в зависимости от концентрации ДНКЖ может происходить конкурентная реакция NO с O²¯, продуктом которой является пероксинитрит, что проявляется отсутствием антиоксидантного действия [4].

Отмечено, что добавление ДНКЖ в донорскую кровь в соотношении 1:50 привело к увеличению удельной активности каталазы в 1,09 раза (р=0,011) соответственно по сравнению с контролем.

Кроме того, показано повышение удельной активности ГР при добавлении ДНКЖ в донорскую кровь во всех представленных соотношениях. Так, добавление ДНКЖ в соотношении 1:150; 1:100; 1:50; 1:25 увеличивало активность фермента в 1,58 раза (р=0,032), в 1,86 раза (р=0,034), в 1,95 раза (р=0,037) и в 1,63 раза (р=0,033) соответственно по сравнению с контролем.

В ходе проведенного исследования выявлен дозозависимый эффект воздействия динитрозильных комплексов железа на активность супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионредуктазы донорской крови в условиях in vitro.

Таким образом, следует отметить, что концентрация NO является главным фактором, обуславливающим его биологический эффект. При низких концентрациях оксида азота в основном преобладают проадаптивные эффекты, направленные на поддержание гомеостаза организма. При высоких концентрациях, преобладающими становятся непрямые эффекты, обусловленные образованием и последующим действием высокореакционноспособного соединения-пероксинитрита. Это согласуется с результатами наших предшествующих исследований [4].

Заключение

В результате эксперимента показано, что при воздействии на донорскую кровь экзогенного NO в виде газового потока максимальное увеличение удельной активности таких антиоксидантных ферментов как супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионредуктаза происходит при использовании концентрации NO — 100 ppm по сравнению с меньшими концентрациями оксида азота (20, 50, 75 ррm). При добавлении к донорской крови в условиях in vitro депонированной формы NO в виде комплексов ДНКЖ в соотношениях 1:100 и 1:50 также отмечено повышение активности СОД, каталазы и ГР. При добавлении ДНКЖ в соотношении 1:25 наблюдался спад активности ферментов антиоксидантной системы, особенно проявившийся в снижении удельной активности СОД.

Список литературы

  1. Ванин А.Ф., Адамян Л.В., Бургова Е.Н., Ткачев Н.А. Физико-химическое обоснование лечебного действия на эндометриоз динитрозильных комплексов железа с тиолсодержащими лигандами // Биофизика. 2014. Т. 59, №4. С. 766–776.
  2. Зарипова Р.И. Изменение содержания оксида азота в тканях крыс при гипокинезии различной длительности: дисc. … канд. биол. наук. Казань: К(П)ФУ, 2012. 131 с.

3. Камилов Ф.Х. Оксид азота при терапии больных псориазом с использованием препаратов из экстракта травы люцерны посевной / Камилов Ф. Х., Бурханова Н. Р., Капулер О. М., Фахретдинова Х. С. // Клинические исследования. Т.18. № 6. С.38-43.

  1. Мартусевич А.К. Анализ влияния оксида азота на физико-химические параметры крови in vitro / Мартусевич А.К., Соловьева А.Г., Перетягин С.П., Диденко Н.В. // Врач-аспирант. 2013. Т.57, №2.1. С.218-222.

5. Паршина С.С. Биологические эффекты оксида азота в развитии кардиоваскулярной патологии как основа применения терагерцовой терапии / Паршина С.С., Афанасьева Т.Н., Тупикин В.Д. // Бюллетень медицинских интернет-конференций.2012. Т.2. №6. С.446-452.

  1. Сибгатуллина Г.В., Хаертдинова Л.Р., Гумерова Е.А. Методы определения редокс-статуса культивируемых клеток растений: учебно-методическое пособие, Казань: Казанский (Приволжский) Федеральный Университет, 2011. 61 с.
  2. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопросы медицинской химии. 1999. Т. 45, №3. С. 109-116.
  3. Степуро Т.Л. Роль оксида азота в регуляции сродства гемоглобина к кислороду при стрессе / Степуро Т.Л., Зинчук В.В. // Фундаментальные и прикладные проблемы стресса: мат. III Междунар. науч.-практ. конф., Витебск, 16-17 апреля 2013 г. Витебск : ВГУ имени П.М. Машерова, 2013. С. 89-91.

9.Тимошин А.А., Лакомкин В.Л., Рууге Э.К., Ванин А.Ф. Фармакокинетика и распределение динитрозильных комплексов железа в тканях органов крыс // Биофизика. 2012. Т.57, № 2. С. 331-337.

10. Sharma S.K., Kim H, Roqler P.J., Karlin K.D. Isocyanide or nitrosyl complexation to hemes with varying axial base ligand donors: synthesis and characterization // Journal of biological inorganic chemistry. 2016. Vol. 21. P. 729-743.

Новости: Ассоциация Российских Озонотерапевтов


Начал свою работу портал о COVID-19!!!

Здесь собраны материалы об успешном применении методик системной озонотерапии при лечении коронавирусной инфекции COVID-19

Читать статьи...


OZOTENS® - терапия дорсалгий и артралгий

OZOTENS ® – терапия – это совместное применение озон – содержащего крема (OZO) и низкочастотной электроимпульсной стимуляции (TENS), открывающее новые возможности для лечения дистрофических заболеваний позвоночника и суставов с выраженными явлениями дорсалгий и артралгий. Главное отличие такого подхода в том, что благодаря форетическому действию электростимуляции, озон – содержащий крем чрескожно доставляется в ткани пораженного органа. Это позволяет эффективнее лечить многие недуги, в особенности заболевания позвоночника, опорно – двигательного аппарата и нервной системы.

Читать и смотреть видео...


ПРИМЕНЕНИЕ ОЗОНОТЕРАПИИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ПАЦИЕНТОВ С COVID-19

Сотрудниками Национального медицинского исследовательского центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова (г. Москва), перепрофилированного под COVID-госпиталь, под руководством проф. Т.А. Федоровой успешно применена системная озонотерапия (введение озонированного физраствора) у пациентов с коронавирусной инфекцией. Предварительные результаты исследования можно прочитать здесь.

Читать статью...


Использование озона при коронавирусной инфекции COVID-19

Официальное экспертное заключение Международного научного комитета по озонотерапии (ISCO3). Были рассмотрены возможности использования саногенетических свойств озона при вирусных инфекциях и, в частности, при китайском коронавирусе COVID-19. После проведённых обсуждений создан документ о потенциально возможных клинических испытаниях применения озонотерапии в качестве средства дополнительной терапии...

Читать подробнее


Журнал "Биорадикалы и антиоксиданты"

Вышел в свет очередной выпуск журнала "Биорадикалы и антиоксиданты" (т.7. №1)  

Читать: Скачать


Повышен SJIF до 7,6 у журнала "Биорадикалы и антиоксиданты"

Рады сообщить, что по итогам оценки 2020 года журнал "Биорадикалы и антиоксиданты" получил новый импакт-фактор по системе Scientific Journal Impact Factor (SJIF), повысив его до SJIF=7,6! Благодарим авторов нашего журнала и приглашаем ученых к активному наполнению "редакционного портфеля"!  

Читать подробнее


Журнал "Биорадикалы и антиоксиданты"

Вышел в свет очередной выпуск журнала "Биорадикалы и антиоксиданты" (т.6. №4)  

Читать: Скачать


Дерматовенерология и косметология: от инновации к практике

Сотрудники клиники «Александрия» д.м.н. Биткина Оксана Анатольевна, Варенова Татьяна Николаевна и Удалова Екатерина Сергеевна приняли участие в работе Межрегиональной научно-практической конференции «Дерматовенерология и косметология...  

Читать подробнее


Конференция Ozonekongress 2019 ( 15-17 ноября 2019 года) Вена, Баден.

Конференция Ozonekongress 2019 ( 15-17 ноября 2019 года) Вена, Баден.


Нобелевская премия по физиологии и медицине — 2019

В 2019 году Нобелевской премии в области физиологии и медицины удостоены американцы Уильям Кэлин и Грегг Семенза, а также британец Питер Рэтклифф. Согласно официальной формулировке Нобелевского комитета, лауреаты отмечены «за открытие механизмов, посредством которых клетки воспринимают доступность кислорода и адаптируются к ней»

Более подробная информация

Официальное объявление Скачать


Новости

 

Конференция в Арубе по передовым технологиям озонотерапии в Медицинском Университете Ксавье 23- 26 апреля 2020 г.

«Озон без границ» - настоящее Общество по озону и неправительственная организация с гордостью представляют Конференцию по усовершенствованным технологиям медицинской озонотерапии в Арубе 2020 года!

Конференция в Турции

В Турции, город Шанлыурфа 10 - 12 сентября 2019 г. состоялась научно-практическая конференция по озонотерапии. Ознакомиться с пост-релизом Конференции можно здесь Скачать

VIII  Азиатско-Европейская  научно-практическая конференция

«ОЗОН  И ДРУГИЕ МЕДИЦИНСКИЕ ГАЗЫ В БИОЛОГИИ И ТЕРАПИИ» состоялась  в Польше, Штутово 10 - 12 сентября 2019 г. Ознакомиться с пост-релизом Конференции можно здесь Скачать

Озонотерапия и алкогольное поражение печени

Клинически подтвержденные в диссертации Н.Э. Жуковой результаты об эффективности озонотерапии у пациентов с алкогольным абстинентным синдромом дополнены сведениями о протективном действии озона в отношении печени при экспериментальном ее алкогольном поражении Скачать

Изучено действие озона на листерий

Доказана бактерицидная активность озонированной воды на примере различных штаммов листерий. Показана дезинфицирующая активность данного агента Скачать

Озонотерапия при болевом синдроме

Проводимые Ассоциацией исследования в области озонотерапии болевого синдрома подтверждаются недавно опубликованными данными мировой литературы Скачать

Конференция в Польше

10 - 12 cентября 2019г. на побережье Польской Балтики состоится VIII Азиатско-Европейская научно-практическая конференция «Озон и другие медицинские газы в биологии и терапии». Ознакомиться с информационным письмом можно здесь

Озонотерапия при боли в спине

В журнале Acta reumatologica Portuguesa опубликован систематический обзор по применению озонотерапии при боли в спине. Скачать обзор можно здесь

Конференция в Коста-Рике

4 — 7 апреля 2019 года в Коста-Рике состоится Конгресс «Ozone without borders». Ознакомиться с информацией

Озонотерапия в паллиативной медицине

Опубликован краткий обзор по применению озонотерапии на этапе паллиативной помощи. Скачать обзор можно здесь

Аппараты для озонотерапии